如何根據(jù)液相系統(tǒng)配置合適的色譜柱

根據(jù)液相系統(tǒng)配置合適的色譜柱

  可擴展的顆粒技術確保了我們的液相色譜柱可與廣泛的色譜儀器匹配使用。根據(jù)分離的目標、所用的儀器平臺或所分析的樣品類型，您可以選擇與系統(tǒng)配置匹配的更合適的色譜柱而不對色譜結果產(chǎn)生不利影響。

下表為根據(jù)儀器的分類選擇合適的液相色譜柱提供了指南。

色譜柱配置

  系統(tǒng)擴散是每個色譜系統(tǒng)固有的，它是造成色譜譜帶展寬的儀器因素，并取決于系統(tǒng)管路體、切換閥配件、柱連接以及流通池體積。系統(tǒng)擴散與色譜柱擴散一起構成了影響分離的總擴散因素。

  因此，在選擇色譜柱配置時了解系統(tǒng)對于色譜峰譜帶展寬的影響是非常重要的。擴散值高的系統(tǒng)使用較大柱體積的色譜柱可以獲得更好柱效；相反，擴散值低的系統(tǒng)使用較小柱體積的色譜柱可以獲得更好柱效。

  下表總結了沃特世液相系統(tǒng)的參數(shù)特點以及在保證色譜分離效率條件下可匹配的色譜柱配置。

  在液相方法轉移時，儀器擴散也是需考慮的液相色譜儀器參數(shù)之一。了解儀器的譜帶展寬體積有助于開發(fā)系統(tǒng)兼容的方法，使您無縫縮放色譜柱規(guī)格或實現(xiàn)方法在不同儀器平臺和實驗室功能方面的轉換。下表是根據(jù)不同儀器的譜帶展寬值給出的色譜柱配置建議。

液相色譜柱的L/dp值對比表

  為了保證一個HPLC方法轉移到UPLC或UHPLC方法時不損失分離度，需要選擇柱長與粒徑比值(L/dp)相當?shù)纳V柱。

  沃特世公司用這個比值來衡量一個色譜柱的分離能力。L/dp值相等的色譜柱可以獲得相同的分離度。因此，對于兩根具有相當L/dp值的色譜柱，越短的色譜柱(粒徑較小的填充顆粒)則可以在更短的時間內提供相當?shù)姆蛛x效果。